PCR仪温度校准目前的使用情况
浏览次数:1085发布日期:2022-01-19
PCR又名聚合酶链式反应,属于一种分子生物学技术,主要用来在短期内放大特定的DNA片段。而PCR仪重要的功能就是自动的完成聚合霉反应,并为DNA片段的放大提供一定的温度条件。当仪器在运行的过程中,主要分为三个特征温度循环,一种是高温变性,具体方法是将DNA样本加热到90~95℃,让其模板转变为单链结构;另一种是低温退火,是将DNA样本的温度降到50~65℃,使之能够与引物相结合;第三种则是适温延伸,就是采用再次升温至70~75℃的方法来完成新链的复制。由此可见,PCR仪温度的准确性与实验的操作息息相关。
目前PCR仪在医学聚合酶链式反应检测中的使用平率较高,如用于亲子鉴定以及个体识别等,这样就导致了在使用的过程中各项指标有可能发生偏差,而且将后期的校准工作交给出厂商或者是由仪器自己进行校准,这样就不能保证在检测的过程中所有数据的准确性。由于PCR仪具有升降温速度快的特点,因此所选用的温度传感器的热惯性要小才能达到标准。因此温度传感器的准确性对实验的结果也有重要的影响,一般进行校准的方法为:温度点在30度时,持续1分钟:温度点在95度时,持续3分钟;温度点在30度时,持续2分钟;温度点在90度时,持续3分钟;温度点在50度时,持续3分钟;温度点在70度时,持续3分钟;温度点在60度时,持续3分钟;温度点在30度时,持续1分钟,再借助系统软件将检测的数据进行系统分析。
PCR仪温度校准技术是一项分子生物学检测技术,在目前的临床检测以及司法检测中被大力的推广应用,在进行检测的过程中会出现很多原因造成结果的不准确性,因此对其进行定期的校准时绝对有必要的。